Флавоноиды в пересчете на рутин что это

Контрактное производство

Косметических средств, БАД к пище, фасовка пищевой продукции.

Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть картинку Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Картинка про Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это

Метод определения содержания флавоноидов в пересчете на рутин

В древности целители применяли полезные качества фруктов и овощей для лечения различных заболеваний, даже не задумываясь о том, благодаря каким веществам, присутствующим в составе этих растений, они способны исцелить то или иное заболевание. Только в середине двадцатого века выяснилось, что одним из веществ, помогающих поддерживать в норме наше здоровье, являются флавоноиды, влияющие на функционирование разнообразных ферментов в процессе попадания с пищей в организм. Флавоноидами широко пользуется как официальная, так и народная медицина, применяя их в лекарственных препаратах и в биологических активных добавках.

Как растительные пигменты, флавоноиды получили известность более двухсот лет назад. В 70-х годах двадцатого века значительно возрос интерес к данному продукту вследствие открытия способности флавоноидов к нейтрализации свободных радикалов, т.е. их антиоксидантных свойств.

Классификация

Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть картинку Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Картинка про Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Фото Флавоноиды в пересчете на рутин что этоФлавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть картинку Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Картинка про Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это
Рис. № 1Рис. № 2
Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть картинку Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Картинка про Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Фото Флавоноиды в пересчете на рутин что этоФлавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть картинку Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Картинка про Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это
Рис. № 3Рис. № 4

Получили свое название флавоноиды от слова из латыни flavus, что значит желтый, так как одни из первых выделенных из растений флавоноидов были окрашены в желтые цвета. Флавоноидами могут быть как водорастворимые, так и липофильные соединения, в основном, оранжевого, красного и жёлтого цвета. Такие виды, как ауроны и антоцианины, представляют собой пигменты растений, обуславливающие цвет растений и плодов. Сегодня выявлено более 6500 различных флавоноидов.

Флавоноиды в природе.

Источники флавоноидов

Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть картинку Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Картинка про Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это

Большое количество флавоноидов содержится в употребляемых нами еде и напитках, полученных из растений. Больше всего их содержится в цедре цитрусовых, луке (особенно красном), красном вине, зелёном чае, какао, облепихе, пиве тёмных сортов, тунбергии, чёрном шоколаде, айве, яблоках, абрикосах, персиках, землянике, смородине, малине и др.

Применение

Флавоноидами при любом использовании не оказывается токсическое действие на человека. Сырье из растений, которые богаты флавоноидами, имеет огромное применение в качестве природных красителей, пищевых антиоксидантов, дубильных веществ. Часть из них имеет противомикробное (антибактериальное) действие. Так, кверцетин действует в качестве противовоспалительного, антигистаминного, спазмолитического и противоотечного компонента, а также как антиоксидант и диуретик. Рутин и кверцетин определяют как P-витамины, которые применяют для уменьшения проницаемости и ломкости капилляров, повышения качества эритроцитов, торможения свёртываемости крови. Наиболее сильно эти качества выражаются в комплексе с аскорбиновой кислотой. Кверцетин используют в лекарственных препаратах, применяемых при лечении обморожений, бронхиальной астмы, воспалений, заболеваний сердца и сосудов, ожогов и др.

Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть картинку Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Картинка про Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это

Рис. № 6. Спектрофотометр «Lambda 25»

Флавоноидам свойственно нейтрализовывать свободные радикалы, образующиеся от воздействия радиационного и ультрафиолетового излучений, защищать клетки организма от разрушения внутриклеточных структур и мембран. Поэтому людям, живущим в районах с повышенным уровнем радиации, высокогорных районах и т.д., особенно рекомендуется потреблять БАДы, содержащие экстракты из натуральных флавоноидов.

Метод определения содержания флавоноидов в пересчете на рутин

В компании «КоролёвФарм» содержание флавоноидов контролируется квалифицированными сотрудниками участка физико-химических испытаний, входящего в состав аналитической лаборатории.

1 г сырья измельчаем, помещаем в колбу со шлифом объемом 150 мл, прибавляем 30 мл 5 % спирта. Присоединяем колбу к обратному холодильнику, нагреваем на водяной кипящей бане 30 мин при периодическом встряхивании, чтобы смыть со стенок частицы сырья. Фильтруем извлечение в колбу объемом 100 мл через вату, при этом частицы сырья не должны попадать на фильтр. В колбу для экстрагирования помещаем вату и прибавляем 30 мл спирта (50 %). Еще дважды повторяем экстракцию, как описано выше, фильтруем извлечение в эту же колбу мерную. Охлаждаем и доводим объем извлечения до метки 50 % спиртом, затем перемешиваем (раствор А).

В колбу объемом 25 мл заливаем 1 мл алюминия хлорида в спирте 95 %, и объем до метки доводим спиртом 95 %. Через 40 мин определяем оптическую плотность спектрофотометром (рис. № 6), применяя длину волны 415 нм и кювету толщиной слоя 10 мм. Раствор сравнения: 1 мл извлечения плюс 1 капля кислоты уксусной плюс спирт 95 %. Параллельно определяем оптическую плотность ГСО рутина, который приготовлен также как испытуемый раствор.

Содержание суммы флавоноидов, пересчитанной на рутин и на сухое сырье в процентах (х), рассчитываем по формуле:

Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть картинку Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Картинка про Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это

D – показатель оптической плотности испытуемой пробы;

Dо – показатель оптической плотности пробы ГСО рутина;

М – показатель массы сырья, г;

Мо – показатель массы ГСО рутина, г;

W – показатель потери массы при высушивании сырья, %.

При соответствии полученных результатов испытаний спецификации на конкретный вид полуфабриката или сырья, они допускаются до следующей стадии технологического процесса. При несоответствии испытания повторяются, и, в случае повторного несоответствия, принимается решение об утилизации (переработке) продукции или возврате сырья поставщику.

Источник

Флавоноиды в пересчете на рутин что это

Кафедра терапии, клинической фармакологии и скорой медицинской помощи Московского государственного медико-стоматологического университета им. А.И. Евдокимова, Москва, Россия

Фармакология препаратов, применяющихся при хронических заболеваниях вен

Журнал: Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 2019;(2): 106-109

Талибов О. Б. Фармакология препаратов, применяющихся при хронических заболеваниях вен. Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 2019;(2):106-109.
Talibov O B. Pharmacology of the drugs prescribed for chronic venous diseases (in Russian only). Khirurgiya. 2019;(2):106-109.
https://doi.org/10.17116/hirurgia2019021106

Кафедра терапии, клинической фармакологии и скорой медицинской помощи Московского государственного медико-стоматологического университета им. А.И. Евдокимова, Москва, Россия

Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть картинку Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Картинка про Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это

Рассмотрены основные группы лекарственных препаратов, применяющихся для фармакотерапии хронического заболевания вен. Описаны основные терапевтические мишени лекарств, приведены данные об их влиянии на тонус венозной стенки, проницаемость и воспаление.

Кафедра терапии, клинической фармакологии и скорой медицинской помощи Московского государственного медико-стоматологического университета им. А.И. Евдокимова, Москва, Россия

Хронические заболевания вен (ХЗВ) нижних конечностей характеризуются симптомами венозной гипертензии, возникшей в результате структурных или функциональных нарушений венозной стенки и клапанов. Вторичные изменения могут проявляться рефлюксом и/или обструкцией.

Цель фармакотерапии — уменьшение выраженности или устранение субъективных и некоторых объективных (отеки) симптомов ХЗВ, а также профилактика и снижение выраженности нежелательных явлений после проведения хирургических вмешательств [1].

Потенциальными точками приложения фармакотерапии являются подавление воспаления, включая адгезию лейкоцитов к эндотелию, в первую очередь в подклапанных областях и участках тромбообразования; уменьшение выброса в кровь сигнальных молекул; регулирование тонуса и проницаемости венозной стенки; эндотелийпротективный эффект, включая регуляцию обмена и оксигенации тканей венозной стенки; подавление свободнорадикального повреждения клеточных структур; уменьшение активности матриксных металлопротеиназ; подавление локальной агрегации тромбоцитов, активация фибринолиза; улучшение лимфатического дренажа [2].

Лекарственные препараты, применяемые для лечения ХЗВ и оказывающие воздействие на вены, традиционно носят название флеботропные препараты. Несмотря на то что это и некоторые другие названия (веноактивные препараты, флебопротекторы, венотоники) нельзя признать однозначно корректными, так как они отражают только один из аспектов действия препаратов, употребление этих терминов стало привычным и узаконено в ряде клинических рекомендаций.

В анатомо-терапевтическо-химической классификации эта группа лекарств отнесена к капилляростабилизирующим средствам (C05C) и представлена следующими категориями:

— C05CX — прочие капилляростабилизирующие средства [3].

На сегодняшний день большинство лекарств, применяемых для лечения ХЗВ имеет растительное происхождение. В таблице Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть картинку Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Картинка про Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Фото Флавоноиды в пересчете на рутин что этоКлассификация основных веноактивных препаратов перечислены группы лекарств с указанием их наиболее распространенных представителей.

Биофлавоноиды

Биофлавоноиды представляют собой полифенольные соединения, в основе которых находится флавоновая структура (рис. 1). Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть картинку Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Картинка про Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Фото Флавоноиды в пересчете на рутин что этоРис. 1. Биофлавоноиды. 1 — приведены структуры агликонов — активных метаболитов диосметин; 2 — гесперетин; 3 — кверцетин; 4 — гидросметин. В зависимости от химической структуры (двойная связь С23 и наличие присоединенной к С3 группы –СН3) флавоноиды разделяются на подклассы: флавонолы (кверцетин, кемпферол), флаваноны (гесперидин), флавоны (диосмин, лютеолин) и т. д. Всего в природе описано более 5000 флавоноидных соединений.

Диосмин и его комбинации с другими флавоноидами 1

Диосмин является одним из наиболее часто применяемых препаратов в группе флавоноидов. Диосмин применяется как самостоятельно («очищенный» диосмин), так и в виде фракции с гесперидином (последний отличается от диосмина отсутствием одной двойной связи между C2 и С3) в соотношении 9:1.

Лекарственная форма, при получении которой использован процесс микронизации получила название микронизированной очищенной флавоноидной фракции (МОФФ). Кроме стандартизованного количества диосмина и гесперидина, в состав МОФФ входят другие биофлавоноиды (изороифолин, линарин), однако их количество не имеет самостоятельного фармакологического значения [4].

Основные молекулы (диосмин и гесперидин), входящие в состав препаратов, представляют собой пролекарства, т. е. они не активны и не оказывают эффекты в тропных органах и тканях. Только после гидролиза ферментами кишечной флоры от диосмина и гесперидина отделяется дисахаридная структура (рутиноза), обусловливающая хорошую растворимость в воде, но недостаточное проникновение через биологические мембраны. После чего метаболиты, обладающие лучшей жирорастворимостью, диосметин и гесперитин, соответственно, всасываются в системный кровоток и оказывают основные эффекты.

Следует также отметить, что в результате метаболизма первой фазы в организме человека возможно превращение флавонов в флаваноны, в частности в эксперименте после приема только очищенного диосмина в плазме начинали обнаруживаться не только диосметин, но и гесперитин [5].

Под влиянием диосметина увеличиваются тонус венозной стенки и скорость лимфотока. Кроме того, диосметин уменьшает проницаемость капилляров. За счет этого действия уменьшается степень периферических отеков. Предположительно механизм этого эффекта связан со способностью диосметина ингибировать фермент катехоламин-О-метилтрансферазу, ответственный за деградацию норадреналина. Таким образом, локальное накопление норадреналина способствует поддержанию относительно высокого тонуса венозной стенки.

Еще одним механизмом, ответственным за увеличение тонуса гладкой мускулатуры под влиянием диосметина является повышение чувствительности миоцитов к ионам кальция [6].

Отдельным механизмом воздействия диосметина на течение ХЗВ является его противовоспалительный эффект. Он обусловлен способностью диосметина модулировать взаимодействие лейкоцитов и моноцитов с эндотелием, уменьшать способность иммунокомпетентных клеток крови к адгезии к венозной стенке, что в итоге тормозит тромбоцит- и комплементзависимые механизмы высвобождения гистамина и сигнальных молекул. В итоге это приводит к уменьшению степени проницаемости сосудов [7].

Кроме того, флавоноиды способствуют уменьшению экспрессии L-селектина и интегринов на мембране лейкоцитов, что также снижает воспалительный ответ.

Еще одним возможным механизмом действия диосмина является его влияние на концентрацию в крови молекул адгезии сосудистой стенки. У пациентов с ХЗВ повышены уровни ICAM-1 (inter-cellular adhesion molecule — молекула клеточной адгезии) и VCAM-1 (vascular cell adhesion molecule — сосудистая молекула клеточной адгезии). Любопытно, что такое же повышение уровня VCAM-1 и ICAM-1 наблюдается у практически здоровых людей после многочасового стояния, т. е., скорее всего, является проявлением застоя крови в нижних конечностях. Снижение под влиянием диосмина экспрессии этих молекул приводит к тому, что клетки крови «не зацепляются» за сосудистые стенки, несмотря на способствующий этому застой крови [8].

Как препараты «очищенного» диосмина, так и комбинация диосмина с гесперидином удовлетворительно переносятся пациентами. Кроме того, несмотря на теоретическую возможность активации цитохромальной системы печени (CYP1A2 в первую очередь) через арил-гидрокарбоновый рецептор, для этой группы не описано важных негативных лекарственных взаимодействий [9].

Гидросмин

Гидросмин так же относится к группе биофлавоноидов. Имеет сходную с диосмином структуру – химически представляет собой 5,3-моно-О-(β-гидроксиэтил)-диосмин и 5,3-ди-О-(β-гидроксиэтил)-диосмин.

Будучи связанным с рутинозидом, является пролекарством, из которого с участием кишечной флоры высвобождается и попадает в системный кровоток действующее вещество гидросметин. Обладает венотонизирующим и противоотечным эффектом, сходным с препаратами диосмина. Предположительный механизм действия — замедление деградации норадреналина посредством ингибирования фермента катехоламин-О-метилтрансферазы с последующим повышением венозного тонуса и уменьшением проницаемости сосудистой стенки [10].

Рутин и рутозиды

Оксерутин представляет собой стандартизованную смесь моно-, ди-, три- и тетрагидроксиэтилрутозидов — производных рутина (кверцетина) [11].

Механизм действия основан на уменьшении проницаемости сосудистого эндотелия и подавлении адгезии нейтрофилов и тромбоцитов к стенке сосуда. Кроме того, для препаратов этой группы описана способность модулировать текучесть мембран эритроцитов [12, 13].

Для кверцетина описана ингибирующая активность в отношении кальмодулин-зависимых ферментов, что приводит к торможению процесса дегрануляции тучных клеток. Возможно, противовоспалительная активность кверцетина реализуется через еще один механизм — подавление образования фактора некроза опухоли-альфа (TNF-a) [14, 15].

Имеются данные, что в отличие от препаратов группы диосмина, рутозиды не повышают сосудистый тонус, а напротив, уменьшают сосудосуживающий ответ на воздействие адреналином и хлоридом калия в эксперименте [16].

К этой группе препаратов также относятся троксерутин и моноксерутин, имеющие сходные фармакологические свойства.

Переносимость рутиновых производных удовлетворительная и мало отличается от переносимости группы диосмина.

Сапонины

Сапонины — гликозидные органические соединения, разделяющиеся по наличию или отсутствию поверхностно-активной и гемолитической активности. Как и флавоноиды, состоят из агликона и углеводной части. Стероидные сапонины синтезируются из холестерина, а тритерпеновые — напрямую из сквалена. Тритерпеновые сапонины делятся в зависимости от количества в структуре агликона углеводных колец на тетра- и пентациклические.

Аэсцин

Кроме того, аэсцин может увеличивать чувствительность 5-HT (5-гидрокситриптамин) рецепторов к серотонину — один из механизмов, за счет которого осуществляется передача сигнала для повышения венозного тонуса [18].

Экстракт рускуса

Препарат, представляющий собой экстракт иглицы шиповатой, содержащий группу пентациклических сапонинов, в первую очередь рускозид и рускогенин. Помимо этого, в состав экстракта входят флавоноиды (производные рутина). Несмотря на то что для алкалоидов этой группы так же как и для других, описано благоприятное воздействие на тонус венозной стенки, экстракт хуже стандартизован по основным действующим веществам.

Кроме того, для препарата описано гипертензивное действие, в частности он применялся для лечения ортостатической гипотензии [19].

Прочие растительные препараты

Водорастворимая фракция флавоноидов из красных виноградных листьев

Комплекс флавоноидов, представленный в основном изокверцетином, кверцетин-глюкуронидом, кверцетин-глюкозидом и кемпфлеролом (стандартизация содержания осуществляется по двум первым компонентам). В отличие от рассмотренных ранее препаратов биофлавоноидов, кверцетин-глюкуронид для всасывания не требует этапа предварительного бактериального метаболизма в кишечнике.

Теоретически ожидаемые эффекты сводятся к эффектам других биофлавоноидных препаратов. Особенности фармакокинетики не имеют клинического значения. В связи с отсутствием опыта соответствующего применения препарат противопоказан беременным [20].

Гинкго билоба

Экстракт листьев гинкго двулопастного содержит два вида алкалоидов: флавоноиды, включая геспередин и кверцетин, и имеющие терпеновую структуру гинкголиды и билобалиды. Основным механизмом, оправдывающим применение гинкго при ХЗВ, является комплексное воздействие биофлавоноидов.

Для гинкголидов влияние на венозный тонус убедительно не описано, однако воздействие терпеновых алкалоидов на ГАМК-рецепторы головного мозга и их свойство индуцировать систему цитохромов p450 (возможные лекарственные взаимодействия) ограничивают применение препаратов этой группы при лечении патологии вен [21].

Синтетические препараты

Добезилат кальция

В отличие от перечисленных выше растительных средств (за исключением очищенного диосмина), добезилат кальция (2,5 дигидрокси-бензен-сульфонат) имеет точно описанный химический состав (рис. 3). Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть картинку Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Картинка про Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Фото Флавоноиды в пересчете на рутин что этоРис. 3. Добезилат кальция. Механизм действия этого препарата состоит в том, что он, действуя на уровне эндотелия и базальной мембраны капилляров, уменьшает гистамин- и брадикинин-индуцированную проницаемость, а также ингибирует локальную агрегацию тромбоцитов за счет ингибирования фактора агрегации тромбоцитов [22].

К недостаткам длительного применения препарата относится риск развития агранулоцитоза, с которым, несмотря на редкость развития, необходимо считаться [23].

Заключение

Как видно из сказанного выше, все применяемые при ХЗВ препараты обладают плейотропным действием, основными механизмами которого являются норадреналин-опосредованное увеличение сосудистого тонуса, подавление локальной воспалительной реакции в первую очередь за счет торможения адгезии иммунокомпетентных клеток крови к сосудистой стенке и уменьшение локальной свертывающей активности за счет подавления адгезии и агрегации тромбоцитов и активации фибринолитических механизмов эндотелия.

Недостатком большинства лекарств, кроме препаратов диосмина (в том числе диосмина-гесперидина) и добезилата кальция является невозможность точного определения количества действующего вещества, что затрудняет дальнейшее изучение как их фармакокинетических свойств, так и зависимостей «доза—эффект».

Отсутствие данных о четкой зависимости «доза—эффект» диктует возможность применения препаратов в широком дозовом спектре. При этом широкое терапевтическое окно, удовлетворительная переносимость и отсутствие выраженных лекарственных взаимодействий позволяют обходиться без тщательного мониторинга безопасности и терапевтического ответа во время курса лечения.

Необходимо отметить, что имеющиеся фармакотерапевтические опции не могут восстановить нормальную структуру венозной стенки и повлиять на причину заболевания, они предназначены для уменьшения выраженности симптомов болезни: отеков, неприятных ощущений в конечностях, чувства распирания, ночных судорог, боли. Назначение лекарств не исключает применения хирургических методов лечения и ношения компрессионного трикотажа.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

The authors declare no conflicts of interest.

Сведения об авторах

Талибов О.Б. Фармакология препаратов, применяющихся при хронических заболеваниях вен. Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 2019;2:106-109. https://doi.org/0.17116/hirurgia2019021106

1 Закрепленное в АТХ название группы препаратов.

Источник

Флавоноиды в пересчете на рутин что это

Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Смотреть картинку Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Картинка про Флавоноиды в пересчете на рутин что это. Фото Флавоноиды в пересчете на рутин что это

В последнее время во многих странах отмечается всё возрастающий интерес к лекарственным препаратам природного происхождения. Это обусловлено, в первую очередь особенностями их химического состава: компоненты фитопрепаратов по структуре близки к метаболитам человеческого организма, они относительно безопасны в применении. Растительные препараты можно гораздо шире, чем синтетические, рекомендовать для симптоматического, профилактического, продолжительного лечения или безрецептурного применения [7]. БАВ лекарственных растений гармонично встраиваются в структурные системы организма человека. Они легче, чем индивидуальные, синтетические лекарственные средства ассимилируются организмом, дают меньше побочных эффектов (или полностью их нивелируют) [1].

Для составления сбора и получения экстракта на его основе, нами использовалось сырье календулы, ромашки, чистотела, фиалки, манжетки обыкновенной [5, 6]. Как известно, в данных лекарственных растениях содержатся флавоноиды, полисахариды, алкалоиды, дубильные вещества, которые обеспечивают противовоспалительный, антимикробный, ранозаживляющий, иммуномодулирующий эффект экстракта [7].

Целью данного исследования является изучение качественного состава экстракта, выделение доминирующей группы БАВ, определение количественного содержания доминирующей группы с целью стандартизации экстракта Неомикон сухого.

Материалы и методы исследования

Объектами исследования служили три серии экстракта Неомикон сухого 01. 03.07, 02. 06.09, 03. 09.12.

Для подтверждения подлинности сухого экстракта использовали спектральную характеристику, проведение качественных реакций, методы восходящей хроматографии на бумаге и в тонком слое сорбента.

Для проведения качественных реакций из экстракта готовили растворы водные, спиртовые, водноспиртовые и растворы на основе 15%-ной уксусной кислоты.

Определение основных групп БАВ (полисахариды, флавоноиды, дубильные вещества и алкалоиды) проводили по общепринятым методикам.

Хроматографирование методом восходящей хроматографии на бумаге проводили следующим образом: на хроматограммы наносили этанольные извлечения из каждого компонента сбора: травы чистотела, манжетки обыкновенной, фиалки, цветков ромашки, ноготков и раствора экстракта в количестве 0,4 мл, а также по 0,02 мл 2%-ных этанольных растворов ГСО рутина, кверцетина, гиперозида, циннаризина. Проводили разделение в течение 32-36 ч в системе растворителей БУВ (4:1:3), высушивали и обрабатывали 25%-ным раствором аммиака, просматривали при дневном и УФ – свете.

Для качественного анализа методом хроматографии в тонком слое использовали хроматографические пластинки «Силуфол УФ-254» серии 922443 размером 15х15, предварительно активированные в сушильном шкафу при t = 110°С в течение 20 мин.

Количественное определение суммы флавоноидов в пересчете на рутин в исследуемом экстракте проводили спектрофотометрическим методом, основанным на реакции окрашивания действующего вещества с раствором алюминия хлорида в уксуснокислой среде. Статистическую обработку результатов исследований проводили по общепринятым методикам ГФ XII издания и с помощью программы Microsoft Excel [3].

Результаты исследования и их обсуждение

В результате проведения качественных реакций получены характерные результаты реакций во всех изучаемых образцах, подтверждающие присутствие полисахаридов, алкалоидов, флавоноидов, дубильных веществ (табл. 1).

Результаты качественных реакций экстракта «Неомикон»

Осаждение 95%-ным этанолом

С тимолом в присутствии концентрированной серной кислоты

На границе слоев розовое кольцо

С пикриновой кислотой

Темно-желтое окрашивание с выпадением осадки

С реактивом Драгендорфа

С реактивом Бертрана

С реактивом Вагнера

Появление мути, осадок

С реактивом Шейблера

Появление мути, бурый

С 2%-ным раствором алюминия

Желтое окрашивание с желто-зеленой флюоресценцией

С 0,5 %-ным раствором железа (III) хлорида

С 1%-ным раствором желатина

С 1%-ным раствором хинина

С 1%-ным раствором квасцов

С 10%-ным раствором среднего свинца ацетата (с добавлением 10%-ным раствора кислоты уксусной)

После отделения осадка – с 1%-ным раствором квасцов

Черно-синее окрашивание фильтрата

Примечание: «+» – положительный эффект реакции

В результате проведенной пробы Брианта установлено наличие в экстракте агликонов и гликозидов флавоноидов. Появление желтого окрашивания в результате реакции с натрия гидроксидом показывает, что флавоноиды в экстракте представлены флавонолами и флавонами. Черно-зелёное окрашивание с раствором железа (III) хлорида свидетельствует о присутствии о-диоксигруппировки в структуре флавоноидов.

Положительный результат реакций с 1%-ным раствором желатина и раствором хинина гидрохлорида, которые являются специфическими реагентами, свидетельствуют о наличие в экстракте дубильных веществ. О группе дубильных веществ можно судить по реакции с 1%-ным раствором квасцов железоаммониевых. Черно-синее окрашивание свидетельствует о преобладании в экстракте гидролизуемых дубильных веществ.

Белый осадок, полученный в результате реакции с 10%-ным раствором свинца ацетата в присутствии кислоты уксусной, черно-синее окрашивание фильтрата после добавления раствора квасцов железоаммониевых свидетельствует о присутствии в экстракте гидролизуемых дубильных веществ.

В ходе проведенных исследований установлено, что в экстракте присутствуют флавоноиды, алкалоиды, полисахариды и дубильные вещества.

Для хроматографического анализа флавоноидов использовали метод восходящей хроматографии на бумаге. Хроматографическому исследованию подвергали образцы из каждого компонента сбора: травы чистотела, манжетки обыкновенной, фиалки, цветков ромашки, ноготков и спиртового и водного растворов экстракта.

Характерная окраска пятен показывает, что они имеют флавоноидную природу. С помощью ГСО флавоноидов подтвердили наличие в экстракте рутина, кверцетина и гиперозида. Результат оценивали по значению Rf и окраске пятна после проявления 25%-ным раствором аммиака. Пятно, соответствующее гиперозиду, имело желтую окраску с Rf 0,72, аналогичные пятна проявились на хроматограммах растворов экстракта и извлечений из ромашки, ноготков, чистотела и фиалки. Пятно, соответствующее кверцетину, желтого цвета с Rf 0,84 проявились на хроматограмме растворов экстракта и извлечений из чистотела и фиалки. Пятно, соответствующее рутину, ярко-желтой окраски с Rf 0,58, проявилось на хроматограммах всех исследуемых образцах.

Одним из наиболее простых и экономичных методов для разделения и идентификации фенольных соединений являются распределительная хроматография в тонком слое сорбента.

Предварительный анализ показал, что экстракт Неомикон содержит фенольные соединения – флавоноиды и фенолкарбоновые кислоты. В связи с эти нами в качестве подвижной фазы использованы следующие системы:

А) этилацетат – этанол – вода (100:27:13);

Б) этилацетат – гексан – хлороформ – н-бутанол (40:30:20:10);

В) этилацетат – уксусная кислота – вода (5:1:1);

Г) этилацетат – муравьиная кислота – вода (80:10:10);

Д) бензол – пиридин – муравьиная кислота (36:9:5);

Е) бутанол – уксусная кислота – вода (4:1:2).

В ходе исследования установлено, что наиболее полное разделение БАВ экстракта Неомикон осуществляется в системе бутанол – уксусная кислота – вода (4:1:2), которая выбрана для проведения качественного анализа (табл. 3).

Люминесцентно-хроматографическая характеристика флавоноидов Неомикон методом ТСХ

Источник

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *