Экстракт тимуса что это такое
Тимический иммуностимулятор в терапии COVID‑19 и иммуннодефицитных состояний
Появление новых патогенных вирусов и ухудшение экологической ситуации подвергает иммунную систему человека все более опасным нагрузкам. Результатом становятся серьезные дисфункции иммунной системы, снижение ее защитных способностей.
В первую половину жизни человека в роли ключевого регулятора иммунитета выступает тимус. Однако уже после 25-30 лет развивается возрастная инволюция этой железы.
Остановить данный процесс нельзя. Но современная медицина уже может восполнить недостаток тимических пептидов, которые запускают и поддерживают иммунный ответ.
Тималин ® — пептидный биорегулятор
Восстанавливает работу иммунной системы при вторичных иммуннодефицитных состояниях различной этиологии.
Что такое Тималин ® (тимуса экстракт)?
Как появился Тималин ® (тимуса экстракт)?
Препарат способствует формированию устойчивого иммунного ответа при повышенной нагрузке на иммунную систему
Стимулирует клеточный иммунитет, регулируя количество Т- и В-лимфоцитов
Усиливает фагоцитоз 4,7,8,9
Увеличивает формирование клеток, продуцирующих IgМ и IgG антитела, как и уровень циркулирующих антител
Восстанавливает нарушенную иммунологическую реактивность
Прием пепарата показан при:
Иммунодефицитных состояниях у взрослых и детей
(6 мес. +)
Острых и хронических вирусных и бактериальных инфекциях
Инфекционных гнойных и септических процессах
Угнетении иммунитета и кроветворения после химиотерапии или лучевой терапии у пациентов с онкологическими заболеваниями
Стойких нарушениях функции тимуса (лучевая болезнь, опухоли тимуса, оперативное удаление тимуса) 1
Как влияет на образование антител добавление Тималин ® в комплексную терапию COVID-19?
Оказалось, что через 104 дня после завершения стандартного курса лечения и первого определения уровня антител у больных этот показатель снизился на 53%. В то же время комбинирование стандартной терапии и препарата Тималин ® привело к снижению уровня антител лишь на 21% (p Тималин ®
Период наблюдения динамики уровня антител 104 дня
По результатам своей работы исследователи сделали следующие выводы 3 :
Тималин ® способен оптимизировать процесс антителообразования, а также индуцировать формирование иммунологической памяти — основного субстрата для успешной вакцинации и формирования иммунной прослойки населения.
Применения Тималина ® целесообразно в комплексном лечении пациентов с COVID-19 для усиления антителообразования и увеличения периода сохранения антител в крови.
Тималин ® может успешно использоваться при вакцинации населения, а также явиться ключом для скорейшего формирования адаптивного иммунитета у пациентов, инфицированных COVID-19.
Режим дозирования Тималина ®1
Содержимое флакона перед инъекцией растворяют в 1-2 мл 0,9% раствора натрия хлорида.
Препарат вводят в/м ежедневно в следующих дозах:
взрослым по 5-20 мг (30-100 мг на курс);
детям в возрасте до 1 года 1 мг;
детям в возрасте 1-3 года 1,5-2 мг;
детям в возрасте 4 6 лет 2-3 мг;
детям в возрасте 7-14 лет 3-5 мг;
В течение 3-10 дней в зависимости от выраженности нарушений иммунитета.
С профилактической целью препарат применяют в/м ежедневно, взрослым по 5-10 мг, детям — 1-5 мг в течение 3-5 дней.
Список использованной литературы:
Хавинсон В.Х., Корнеенков А.А., Попович И.Г., Дудков А.В., Кузник Б.И. Мета-анализ иммуномодулирующей активности лекарственного пептидного препарата Тималина. Современные проблемы здравоохранения и медицинской статистики. 2020, № 4, с. 108-124.
Хавинсон В.Х и соавторы Влияние Тималина на адаптивный иммунитет при проведении комплексной терапии пациентов с COVID-19. Клиническая медицина 2020:98(8), с. 593-595.
Хавинсон В. Х. Лекарственные пептидные препараты: прошлое, настоящее, будущее. Клиническая медицина. 2020; 98(3): 165 177.
Хавинсон В.Х., Линькова Н.С., Чилисова Н.И., Ивко О. М. Тималин: применение для иммунокоррекции и молекулярные аспекты биологической активности. Успехи современной биологии, 2021, том 141, № 1, с. 25-31.
Хаитов Р.М., Пинегин Б. В. Иммуномодуляторы: классификация, фармакологическое действие, клиническое применение. Фарматека. 2004, № 7, с. 56.
Хавинсон В.Х., Кузник Б.И., Рыжак Г. А. Пептидные геропротекторы эпигенетические регуляторы физиологических функций организма. СПб.: РГПУ им. А. И. Герцена. 2014.
Белокрылов Г.А., Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., Софронов Б.Н. Влияние низкомолекулярных экстрактов из гетерологичных тимуса, эпифиза и гипоталамуса на иммунный ответ у мышей. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.1976; 2:202 4.
Белокрылов Г.А., Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., Софронов Б.Н. Низкомолекулярная гомогенная фракция тимуса, стимулирующая иммуногенез. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.1977; 7:56 58.
Тималин : инструкция по применению
Что собой представляет препарат, и для чего его применяют
Активным компонентом лекарственного средства Тималин является комплекс полипептидов, выделенных из тимуса крупного рогатого скота. Тималин оказывает регулирующее влияние на иммунитет.
• в комплексной терапии заболеваний, сопровождающихся угнетением клеточного иммунитета, у взрослых:
— острые и хронические гнойно-воспалительные заболевания вирусной и бактериальной природы;
— угнетение клеточного иммунитета после лучевой и химиотерапии онкологических заболеваний;
— профилактика инфекционных осложнений у пациентов после лучевой и химиотерапии онкологических заболеваний.
• в комплексной терапии заболеваний, сопровождающихся угнетением клеточного иммунитета, у детей (см. раздел «Особенности применения в педиатрии»):
— острые и хронические гнойно-воспалительные заболевания вирусной и бактериальной природы.
Если улучшение не наступило или Вы чувствуете ухудшение, необходимо незамедлительно сообщить об этом врачу.
Не принимайте препарат, если
• у Вас повышенная чувствительность к действующему веществу или любым другим компонентам препарата (перечисленным в разделе Состав);
• Вы беременны или кормите грудью.
Также смотрите раздел «Особые указания и меры предосторожности».
Особые указания и меры предосторожности
Перед применением препарата ТИМАЛИН сообщите лечащему врачу, если у Вас диагностированы следующие заболевания/состояния или что-либо из нижеперечисленного относится к Вам:
• предрасположенность к аллергическим заболеваниям.
Назначение и лечение тималином необходимо проводить под контролем иммунологических показателей.
Относительными противопоказаниями к применению препаратов н основе пептидов, выделенных из тимуса крупного рогатого скота, являются перименструальный период, некоторые эндокринные синдромы (аденома гипофиза, акромегалия) и время физиологической активности тимуса вплоть до полового созревания;
Использование препаратов на основе пептидов, выделенных из тимуса крупного рогатого скота у пациентов с тяжелыми эндокринными нарушениями и у женщин во второй фазе менструального цикла может чаще вызывать побочные эффекты.
В настоящее время препараты на основе пептидов из тимуса крупного рогатого скота следует использовать только при наличии явного иммунодефицита.
Особенности применения в педиатрии
Данные по применению у детей ограничены.
У детей Тималин применяется в дозе 0,1-0,2 мг/кг в сутки внутримышечно в течение 5 дней. При необходимости курс можно повторить через 2-4 недели.
Детский возраст, вплоть до пубертатного периода является периодом максимальной активности вилочковой железы. Поэтому следует избегать применения Тималина в период физиологической активности тимуса включая период полового созревания – 12-14 лет.
Детский и подростковый возраст является относительным противопоказанием к применению препаратов на основе полипептидов выделенных из тимуса крупного рогатого скота и использование возможно только после тщательной оценки соотношению польза-риск при наличии признаков явного иммунодефицита.
Не применяйте препарат у детей в возрасте до 1 года в связи с отсутствием данных об эффективности и безопасности.
В связи с максимальной активностью вилочковой железы в пубертатный период рекомендуется избегать использования препаратов тимуса у подростков 12-17 лет.
Другие препараты
Сообщите лечащему врачу, если Вы принимаете, недавно принимали или собираетесь принимать любые другие препараты. Это относится к любым растительным препаратам или препаратам, которые Вы купили без назначения врача.
Некоторые препараты можно принимать вместе с препаратом ТИМАЛИН, а другие могут вызывать нежелательные реакции при совместном приеме с препаратом ТИМАЛИН.
Сообщите лечащему врачу, если Вы принимаете любой из лекарственных препаратов, перечисленных ниже:
• Препараты с аналогичным механизмом действия (Т-активин, тимактид, тимоген или тимоптин);
• Гормоны гипофиза (соматотропин, лютеинизирующий гормон) и эстрогены – препарат может проявлять синергизм;
• Половые гормоны (прогестины, андрогены), гормоны надпочечников – с точки зрения фармакологического действия, являются антагонистами препарата ТИМАЛИН.
Беременность, грудное вскармливание и фертильность
Если Вы беременны или кормите грудью, думаете, что можете быть беременны, или планируете беременность, перед началом применения препарата проконсультируйтесь с лечащим врачом. Применение препарата ТИМАЛИН во время беременности и в период грудного вскармливания противопоказано.
Управление транспортными средствами и работа с механизмами
Не влияет на способность к управлению транспортными средствами и работу с механизмами.
Применение препарата
ТИМАЛИН применяют в виде внутримышечных инъекций.
Не вводить внутривенно!
Для внутримышечного введения необходимо использовать только свежеприготовленный раствор.
Недопустимо хранение и последующее использование готового раствора.
Всегда принимайте этот препарат в полном соответствии с рекомендациями лечащего врача. При появлении сомнений, проконсультируйтесь с лечащим врачом.
ТИМАЛИН следует принимать:
ТИМАЛИН вводится по 5-20 мг ежедневно в течение 3-10 дней в зависимости от клинической ситуации. Курсовая доза 30-100 мг.
При необходимости через 1-6 месяцев курс можно повторить.
Дети (см. раздел «Особенности применения в педиатрии»)
Применяется в дозе 0,1-0,2 мг/кг в сутки внутримышечно в течение 5 дней. При необходимости курс можно повторить через 2-4 недели.
Не применяйте препарат у детей в возрасте до 1 года в связи с отсутствием данных об эффективности и безопасности.
Не применяйте препарат у подростков 12-17 лет (см. раздел «Особые указания и меры предосторожности»).
Пациенты с нарушением функции почек, печени, пациенты пожилого возраста
Данные об особенностях дозирования у пациентов с нарушением функции почек, печени, пациентов пожилого возраста отсутствуют.
Если Вы получили больше препарата ТИМАЛИН, чем рекомендовано
Данные о случаях передозировки при применении препарата ТИМАЛИН отсутствуют.
Риск передозировки препаратов на основе пептидов, выделенных из тимуса крупного рогатого скота, маловероятен и ограничен, поскольку пептиды тимуса чувствительны к протеазам организма, которые снижают концентрацию лекарственного средства в крови.
Если Вы считаете, что получили слишком большую дозу препарата ТИМАЛИН, немедленно обратитесь к врачу.
При наличии вопросов по применению препарата обратитесь к лечащему врачу.
Возможные нежелательные реакции
Подобно всем лекарственным препаратам ТИМАЛИН может вызывать нежелательные реакции, однако они возникают не у всех.
ТИМАЛИН может вызывать следующие нежелательные реакции (частота неизвестна):
• Зуд, покраснение в месте введения.
Если у Вас появились нежелательные реакции, сообщите об этом своему лечащему врачу. Это также относится к любым нежелательным реакциям, которые не указаны в данном листке-вкладыше.
Сообщение о нежелательных реакциях
Вы также можете сообщить о нежелательных реакциях в информационную базу данных по нежелательным реакциям (действиям) на лекарственные препараты, включая сообщения о неэффективности лекарственных препаратов (УП «Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении», rceth.by). Сообщая о нежелательных реакциях, Вы помогаете получить больше сведений о безопасности препарата.
Хранение препарата
Хранить в защищенном от света месте при температуре не выше 25 °C.
Хранить в оригинальной упаковке.
Хранить в недоступном и невидимом для детей месте.
Срок годности – 3 года.
Не применяйте препарат после окончания срока годности, указанного на упаковке.
Не выбрасывайте препарат в канализацию. Уточните у работника аптеки, как избавиться от остатков препарата, которые больше не потребуются. Эти меры позволят защитить окружающую среду.
Состав
На один флакон: тималин – 10 мг, аминоуксусная кислота (глицин) – 20 мг.
Внешний вид
ТИМАЛИН, порошок лиофилизированный для приготовления раствора для инъекций 10 мг, представляет собой порошок аморфный или порошок аморфный, уплотненный в таблетку, белого или белого с желтоватым оттенком цвета.
Упаковка
ТИМАЛИН выпускается по 10 мг во флаконах вместимостью 5 мл, укупоренных пробками резиновыми и обкатанных колпачками алюминиевыми.
По 5 флаконов или по 5 флаконов в комплекте с 5 ампулами растворителя (дата истечения срока годности растворителя превышает дату истечения срока годности лекарственного средства) вместе с листком-вкладышем в пачке из картона.
Условия отпуска
Держатель регистрационного удостоверения и производитель
Республика Беларусь, 220007, г. Минск,
ул. Фабрициуса, 30, тел./факс: (+375 17) 220 37 16,
Тималин ® (Thymalin) инструкция по применению
Владелец регистрационного удостоверения:
Контакты для обращений:
Лекарственная форма
Форма выпуска, упаковка и состав препарата Тималин ®
Лиофилизат для приготовления раствора для в/м введения в виде таблетки, комочков, пластинок или порошка белого или белого с желтоватым оттенком цвета.
1 фл. | |
тимуса экстракт* | 10 мг |
* получен из зобных желез телят и молодняка крупного рогатого скота возрастом до одного года.
Фармакологическое действие
Восстанавливает нарушенную иммунологическую реактивность (регулирует количество и соотношение Т- и В-лимфоцитов и их субпопуляций, стимулирует реакции клеточного иммунитета, усиливает фагоцитоз), стимулирует процессы регенерации и кроветворения в случае их угнетения, а также улучшает течение процессов клеточного метаболизма.
Показания препарата Тималин ®
Иммунодефицитные состояния у взрослых и детей в возрасте от 6 мес до 14 лет при:
Открыть список кодов МКБ-10
Код МКБ-10 | Показание |
A04.9 | Бактериальная кишечная инфекция неуточненная |
A08.4 | Вирусная кишечная инфекция неуточненная |
A40 | Стрептококковый сепсис |
A41 | Другой сепсис |
B34.9 | Вирусная инфекция неуточненная |
C37 | Злокачественное новообразование вилочковой железы |
D38.4 | Вилочковой железы [тимуса] |
D84.9 | Иммунодефицит неуточненный |
E32.8 | Другие болезни вилочковой железы |
J85 | Абсцесс легкого и средостения |
J86 | Пиоторакс (эмпиема плевры) |
K65.0 | Острый перитонит (в т.ч. абсцесс) |
L02 | Абсцесс кожи, фурункул и карбункул |
L03 | Флегмона |
N73.5 | Тазовый перитонит у женщин неуточненный |
O08.0 | Инфекция половых путей и тазовых органов, вызванная абортом, внематочной и молярной беременностью |
O85 | Послеродовой сепсис |
T66 | Неуточненные эффекты излучения (лучевая болезнь) |
T79.3 | Посттравматическая раневая инфекция, не классифицированная в других рубриках |
Y43 | Препараты преимущественно системного действия |
Y83.6 | Удаление другого органа (частичное) (полное) |
Y84.2 | Радиологическая процедура и лучевая терапия |
Режим дозирования
Содержимое флакона перед инъекцией растворяют в 1-2 мл 0.9% раствора натрия хлорида.
При необходимости проводят повторный курс (через 1-6 месяцев).
Экстракт тимуса что это такое
Пептидная тимомиметическая регуляция представляет собой тканеспецифическую регуляцию гомеостаза на уровне целостного организма. Её задача состоит в регуляции развития и функции Т-клеток как циркулирующих, так и находящихся в органах и тканях. Пептиды тимуса активируют экспрессию рецепторов Т-лимфоцитов и их функциональную активность как в культуре клеток, так и в организме.
При миграции костномозговых предшественников «пре-Т-клеток» в вилочковую железу, в результате их контакта с эпителиальным микроокружением тимуса, происходит их дифференцировка на Т-хелперы и Т-супрессоры (1).
Основным гормоном эпителиальных клеток тимуса является тимозин. Впервые в клинике тимозин был применен для лечения ребенка с гипоплазией тимуса (9). Использование тимозина способствовало увеличению количества Т-клеток в крови и улучшению клинической симптоматики. Длительное применение Тимозина у детей с врожденной иммунологической недостаточностью (гипоплазия тимуса, синдромы Ди Джорджа и Вискотта-Олдрича, атаксия-телеангиэктазия и др.), а также у больных со злокачественными новообразованиями, приводило к улучшению показателей иммунного статуса. После проведения лучевой терапии в комбинации с тимозином у пациентов быстрее восстанавливалась иммунологическая реактивность. Кроме этого тимозин применяли с целью иммунокоррекции при вирусных, бактериальных, грибковых инфекциях и других заболеваниях.
При экспериментальном атеросклерозе у кроликов и крыс, получавших тималин внутримышечно через день в течении 3 месяцев, отмечалась четкая тенденция к снижению содержания холестерина и триглицеридов в крови, холестерина в печени и аорте. Степень атеросклеротического поражения аорты у этих животных была значительно ниже чем в контроле (не получавших тималин). При этом значительно уменьшалась сенсибилизация лимфоцитов к атерогенным липопротеидам (7).
Образование аутоантител является не патологией, а фундаментальной биологической закономерностью. Физиологические аутоантитела участвуют в метаболизме клетки и ткани и служат для выведения уже отживщих – гериатрических – собственных макромолекул (2). В силу гигантских размеров и повторяющихся одинаковых антигенных детерминант на поверхности молекулы ЛПНП, их можно отнести к тимус-независимым антигенам, способным через (СД14) индуцировать размножение и дифференцировку антителопродуцирующих В-лимфоцитов и синтез аутоантител класса IgМ независимо от функции Т-хелперов.
Стимулирующий эффект м-ЛПНП на митогенную активность лимфоцитов сочетается с подавлением активности Т-супрессоров (СД8). При этом соотношение СД4/СД8 возрастает и стремится к четырем, пяти, шести (по нашим данным) за счет резкого уменьшения количества СД8, сопровождающееся снижением их активности. В силу уменьшения количества СД8 со снижением их активности и повышением активности СД4 происходит переключение синтеза аутоантител на более дифференцированные иммуноглобулины класса IgG и IgA со снижением контроля со стороны СД8 за количеством синтеза антителообразующими клетками аутоантител. В результате идет непрограммируемый синтез аутоантител с образованием большого количества гигантских макромолекул – циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) «м-ЛПНП+аутоантитело». ЦИК «м-ЛПНП+аутоантитело» активно захватываются эндотелиальными клетками сосудистой стенки через Fc-фрагмент аутоантитела. Модифицированные-ЛПНП в очагах атерогенеза запускают каскад реакций, характеризующих иммунное воспаление, способствующих прогрессированию атеросклероза (3).
В связи с формированием клеток иммунологической памяти к синтезу патологических аутоантител к ЛПНП и наличием иммунного воспаления в очагах атерогенеза, весь этот процесс приобретает хроническое течение по типу реакции гиперчувствительности с само регуляцией замедленного типа. При этом уже не имеет принципиального значения уровни холестерина и триглицеридов в крови, поскольку иммуновоспалительный механизм запущен, и он будет прогрессировать (6). Вот почему, на практике, мы не видим обратного развития атеросклеротического процесса от применения статинов, а имеем только замедление атеросклеротического поражения сосудистой стенки.
В лечении атеросклероза важно не только применение средств снижающих холестерин, но и использование препаратов нормализующих Т-клеточный иммунитет (Климов). В настоящее время одним из таких препаратов является ТИМОЗИН.
Источником для выделения и производства препаратов тимомимических пептидов в основном является экстракт из тимуса телят до 1 года жизни. В последней четверти ХХ века были разработаны такие лекарственные средства как тимозин, тимопоэтин, тимостимулин, тактивин, тималин и др.
В институте экспериментальной медицины АМН СССР А.Н. Климовым, Ю.М. Лопухиным были проведены работы по лечению атеросклероза и ИБС иммуномодулятором Тактивином в дозе 100 мкг подкожнономером 5 через день. После лечения наблюдалось четкое снижение коэффициента СД4/СД8, за счет увеличения Т-супрессоров, т.е. снижение аутоагрессии. В результате уменьшается синтез патологических аутоантител к ЛПНП и соответственно снижается количество ЦИК «м-ЛПНП+аутоантитело». Но через 1,5 – 2 месяца после лечения В-клетки вновь выходят из под контроля иммунорегуляторных лимфоцитов. Авторы рекомендуют с таким интервалом проводить повторные курсы иммуномодулирующей терапии (4, 5).
Материалы и методы
В санатории «Загорские дали» УД П РФ с 1997 г. прошли реабилитацию более 300 больных ИБС после АКШ с 14 – 20 дня после операции. Из них 44 пациента в возрасте от 40 до 70 лет (средний возраст 53 года) продолжали наблюдаться в течении 3, 5, 7 и более лет ежегодно. Инфаркт миокарда до операции АКШ перенесли 27 больных. Шунтирование одного сосуда проведено 4-м больным, двух сосудов 8-и больным, трёх – 15-ти больным, четырёх – 12-ти больным и пять шунтов – 6-ти больным.
Все больные получали стандартную санаторно-курортную терапию, включающую в себя медикаментозную терапию, физио-бальнео лечение, гипербарическую оксигенацию, дифференцированные методики лечебной физкультуры, диетотерапию и аутогенную тренировку. Для объективизации результатов в качестве функционального контроля использовались ЭКГ, ВЭМ, Холтеровское мониторирование ЭКГ и тетрополярная реография. В группе вмешательства у 30 больных в качестве иммуномодулирущей терапии применялся Тактивин в дозе 100 мкг через день подкожно номером 5.
После курса иммуномодулирующей терапии в группе вмешательства коэффициент аутоагрессии СД4/СД8 снизился до 2.6, при этом количество аутоантител к ЛПНП уменьшилось в сыворотке до 110±6,5 х10 ־ 3 г/л, а в ЦИК до 1,1±0,16 х10 ־ 3 г/л.
Как показали работы Климова А.Н. длительность эффекта иммуномодулирующей терапии сохранялись около 1,5 – 2 месяцев. Но препараты выделенные от телят, в настоящее время не получили должного применения из за возможности переноса вирусных заболеваний данных животных на человека. В связи с этим, нами ООО «АПО-В», в качестве сырья для получения тимозина была взята вилочковая железа от народивщегося 1 месячного гренландского тюленя (Белёк и Серка). Активность данного препарата выше чем у препарата от годовалого теленка. При исследовании тимозина было выявлено, что препарат выделенный из вилочковой железы гренландского тюленя термолабилен. В связи с этим нами была изменена технологическая цепочка выделения тимозина, в которой этап прогревания и участие солевых буферных растворов были исключены. Все работы по выделению тимозина проводились при + 4 г С на дистиллированной воде.
В качестве критериев оценки биологической активности использованы:
1. Действие на цитотоксическую активность мононуклеарных клеток периферической крови здоровых доноров по отношению к линии опухолевых клеток К562;
2. Влияние на пролиферативную активность мононуклеарных клеток здоровых доноров;
3. Влияние на митогенез мононуклеарных клеток здоровых доноров.
Выделение мононуклеарных лейкоцитов (МЛ)
МЛ выделяли из стабилизированной гепарином (25 Ед/мл) периферической крови 25 здоровых доноров на одноступенчатом градиенте фиколла («Pharmacia», плотностью 1.077 г/см 3 ), центрифугированием при 400 gв течение 30 минут. Мононуклеарные лейкоциты, образовавшие интерфазное кольцо, собирали пипеткой и трехкратно отмывали в среде 199. После каждой отмывки в 10-кратном объеме среды клетки осаждали центрифугированием при 200 g.
В работе использованы лиофилизированные препарат «Тимозин Т» и Контроль (референц-образец тимозина Р). Биологическую активность исследуемых препаратов сравнивали в концентрациях 100 мкг/мл, 10 мкг/мл, 1 мкг/мл и 0,1 мкг/мл.
Цитотоксическую активность мононуклеарных лейкоцитов периферической крови доноров под воздействием препаратов тимозина определяли на NК-чувствительной линии опухолевых клеток К-562. Опухолевые клетки (1×10 4 в 1 мл) инкубировали в культуральной среде с МЛ, обработанными тимозином в дозах 0,1; 1,0; 10,0; 100,0 мкг/мл (в соотношениях клетки-мишени/эффекторы равных 1:5, 1:2, 1:1и 1:0,5) в плоскодонных 96-луночных микропланшетах (фирмы Costar, Франция) 18 часов. Затем в лунки добавлялся витальный краситель МТТ (фирмы Sigma, США) и по оптической плотности, измеряемой на мультискане МСС-340 (фирмыLabsystem, Финляндия), рассчитывался процент лизиса опухолевых клеток (процент цитотоксичности).
Оценка пролиферативной активности МЛ
Оценку пролиферативной активности МЛ при действии препаратов проводили в колориметрическом тесте с использованием витального красителя AlamarBlue (Biosours, США) в стерильных условиях, используя ламинарный бокс с горизонтальным потоком воздуха (JuanVFS 906). Суспензию МЛ, обработанную препаратами, в обогащенной среде RPMI 1640 вносили в 96-луночные планшеты в количестве 10х10 3 клеток/лунку инкубировали в течение 4 суток в стандартных условиях культивирования. По окончании инкубации в лунки вносили краситель AlamarBlue (10%). Флюоресценцию измеряли после четырехчасовой инкубации при 37ºС, 5% СО2 на флюориметре VersaFluor V13 (Vtocal) при длине волны возбуждения 530–560 нм, эмиссии 590 нм и выражали в условных единицах (у.е.) флюоресценции. Рассчитывали индекс стимуляции (ИС), представляющий собой отношение пролиферативной активности МЛ, инкубированных с Контролем к пролиферативной активности МЛ при стимуляции «Тимозина Т».
Результаты изучения биологической активности препаратов представлены в таблицах.
В концентрации 100 мкг/мл препарат «Тимозин Т» обладал большей активностью в стимуляции NK-активности в сравнении с контролем (p