Экстракция что это в медицине

ЭКСТРАГИРОВАНИЕ

ЭКСТРАГИРОВАНИЕ (латинский extrahere извлекать, вытягивать; синоним экстракция) — процесс разделения смеси жидких или твердых веществ путем извлечения из нее индивидуальных соединений с помощью селективных растворителей — экстрагентов. Результатом экстрагирования является переход извлекаемого (экстрагируемого) вещества из одной фазы (жидкой или твердой) в другую фазу (фазу жидкого экстрагента).

Экстрагирование используют в лабораторных и промышленных условиях для извлечения из биол. материала и разделения смеси белков (см.), в том числе ферментов (см.), а также жиров (см.), витаминов (см.), гормонов (см.) и других биологически активных соединений. Процессы экстрагирования имеют важное значение в современной фармации, особенно для извлечения природных органических соединений из высушенного или свежего растительного сырья. Путем экстрагирования получают основную группу галеновых и новогаленовых лекарственных средств, экстракты и настойки, препараты из сырья животного происхождения, алкалоиды (см.), антибиотики (см.) и др. Экстрагирование широко применяют в химической, фармацевтической, пищевой, нефтеперерабатывающей, металлургической и других отраслях промышленности. Экстрагирование используют в аналитической химии и радиохимии для разделения химических элементов (см.), а также для разделения, концентрирования и очистки радиоактивных изотопов (см.).

Экстрагирование позволяет избирательно извлекать вещества из исходного раствора, повышать концентрацию извлекаемых веществ, разделять вещества, содержащиеся в исходном растворе, и получать их в чистом виде. К достоинствам экстрагирования относятся низкие рабочие температуры, рентабельность извлечения веществ из разбавленных растворов (см.), возможность разделения соединений с близкой точкой кипения и азеотропних смесей (см.), сочетаемость с другими технологическими процессами, простота и возможность автоматизации процесса.

Экстрагирование состоит из трех стадий: 1) смешение исходного материала с экстрагентом; 2) механическое разделение (расслаивание) двух фаз, при котором получается экстракт (раствор извлекаемого вещества в экстрагенте) и остаток исходного раствора (рафинат) или твердого материала; 3) удаление экстрагента из экстракта и регенерация экстрагента для повторного использования. Экстракт отделяют путем фильтрования (см.), центрифугирования (см.) или отстаивания; для выделения индивидуального вещества из экстракта с одновременной регенерацией экстрагента для повторного использования применяют дистилляцию, выпаривание, высаливание, кристаллизацию, вымораживание и другие способы.

Экстрагирование подчиняется законам диффузии (см.) и равновесного распределения (см. Распределения закон). Кинетика экстрагирования описывается общим уравнением массообмена M = k × Δc × F × t, где М — количество экстрагированного вещества, k — коэффициент массопередачи, Δc — разность концентраций экстрагируемого вещества в обеих фазах, F — величина поверхности соприкосновения фаз, t — время. Для ускорения и повышения полноты экстрагирования достигают больших значений М путем увеличения значения к в результате перемешивания, увеличения поверхности соприкосновения взаимодействующих фаз (F) посредством измельчения материалов или диспергирования одной из жидких фаз на мелкие капли, увеличения до оптимальных значений таких параметров, как время, температура и количество экстрагента. Для характеристики распределения вещества между водной фазой и не смешивающейся с ней органической фазой используют такую величину, как коэффициент распределения D, который представляет собой отношение концентраций вещества в органической фазе и в водной фазе. Степень извлечения E выражается в процентах:

Экстракция что это в медицине. Смотреть фото Экстракция что это в медицине. Смотреть картинку Экстракция что это в медицине. Картинка про Экстракция что это в медицине. Фото Экстракция что это в медицине

где Vводн и Vорг — объемы водной и органической фаз соответственно.

Классификация процессов экстрагирования основана на различных признаках: механизме экстрагирования, строении и свойствах получаемых соединений, свойствах экстрагентов, формах нахождения извлекаемого вещества в растворе и др. Различают физическое разделение (экстрагирование ковалентных соединений) и экстрагирование, происходящее с изменением химической формы веществ (катионообменное, анионообменное экстрагирование, экстрагирование ионных ассоциатов и внутрикомплексных солей). В зависимости от типа используемого экстрагента выделяют экстрагирование нейтральными растворителями и экстрагирование реагентами кислотного и основного характера.

Экстрагент должен обладать селективностью (хорошо растворять извлекаемое соединение и плохо растворять сопутствующие соединения), хорошо диффундировать, иметь малую вязкость, по возможности извлекать вещество без его существенных химических превращений, легко регенерироваться, быть нетоксичным, доступным и относительно дешевым. При выборе экстрагента следует также учитывать степень смешиваемости фаз, относительный удельный вес (массу) и тенденцию к образованию эмульсий (см.). В зависимости от свойств исходного материала, требований к конечному продукту и других показателей в качестве экстрагентов применяют воду (экстрагирование водой иногда называют выщелачиванием), этиловый спирт, эфир, глицерин, масла, хлороформ и др. Иногда экстрагирование проводят несколькими растворителями последовательно или в смеси (например, при разделении компонентов с близкой растворимостью в исходном растворителе). При однократном экстрагировании степень извлечения вещества из исходного раствора сравнительно невелика, поэтому взаимодействующие фазы чаще всего многократно перемешивают и дают им расслаиваться; наиболее эффективно с точки зрения извлечения нужного вещества встречное движение исходного раствора и экстрагента.

Различают жидкостное экстрагирование — полное или частичное извлечение одного или нескольких компонентов из гомогенной жидкой смеси путем обработки ее жидким растворителем, а также экстрагирование в системе твердое тело — жидкость. Известны два основных способа жидкостного экстрагирования из гомогенной жидкой фазы — ступенчатое и непрерывное. При ступенчатом экстрагировании цикл смешения исходной смеси с экстрагентом и последующее отстаивание фаз в отдельных аппаратах повторяют. Используемые для ступенчатого экстрагирования аппараты могут быть периодически действующими (в промышленности они имеют ограниченное применение вследствие низкой эффективности) и непрерывно действующими (в том числе аппараты с механическим перемешиванием). Для более полного извлечения нужного вещества применяют возврат части экстрагента из экстракта и части рафината в аппарат навстречу уходящим потокам (многоступенчатое противоточное экстрагирование с возвратом). Примером непрерывного экстрагирования может служить часто используемое в промышленности непрерывное противоточное экстрагирование в колоннах с насадкой, в полых колоннах с разбрызгивателем и др. В дифференциально-контактных экстракторах процесс изменения состава фаз приближается к непрерывному. При проведении непрерывного экстрагирования из твердой фазы растворитель испаряется в специальном сосуде, его пары конденсируются в холодильнике, откуда растворитель стекает на экстрагируемый материал, проходит через него, и экстракт стекает опять в сосуд, из которого происходит испарение растворителя. Цикл повторяется до полного извлечения нужного вещества. В лабораторных условиях для экстрагирования из твердой фазы применяют аппарат Сокслета, используемый главным образом для экстрагирования жиров и других липидов (см.). Пары подогреваемого растворителя (главным образом эфира) поступают в холодильник, из него растворитель попадает на измельченный материал, находящийся в гильзе из фильтровальной бумаги, помещенной в средней цилиндрической части аппарата. Эфир пропитывает материал, растворяет содержащиеся в нем липиды и сливается в колбу, откуда пары эфира вновь поступают в холодильник, а экстракт накапливается в колбе.

Применяемые в промышленности аппараты для экстрагирования в системе твердое тело — жидкость различают также по режиму работы (периодические, пол у периодические, непрерывные), по взаимному направлению движения экстрагента и твердых частиц (прямоточные и противоточные, с процессом в неподвижном, движущемся и «кипящем» слое), по виду циркуляции (с однократным прохождением экстрагента, с рециркуляцией экстрагента), но давлению в экстракторе (атмосферные, вакуумные и работающие под давлением), по свойствам частиц твердой фазы (крупнозернистые, мелкозернистые, тонкодисперсные, пастообразные, волокнистые вещества) и др.

Библиогр.: Аксельруд Г. А. и Лысянский В. М. Экстрагирование, Система твердое тело — жидкость, Л., 1974; Берестовой А. М. и Белоглазов И. Н. Жидкостные экстракторы, Л., 1982; Золотов Ю. А. и Кузьмин Н. М. Экстракционное концентрирование, М., 1971; Моррисон Дж. и Фрейзер Г. Экстракция в аналитической химии, пер. с англ., М., 1960; Муравьев И. А. Технология лекарств, т. 1, М., 1980; Трейбал Р. Жидкостная экстракция, пер. с англ., М., 1966.

Источник

Экстракция катаракты: эстракапсулярная и интракапсулярная

Экстракция что это в медицине. Смотреть фото Экстракция что это в медицине. Смотреть картинку Экстракция что это в медицине. Картинка про Экстракция что это в медицине. Фото Экстракция что это в медицине

Экстракция катаракты — наверное, самая старая техника хирургического лечения данного заболевания. Практиковавшаяся некогда в Древнем Египте, Индии и Китае, к сегодняшнему дню методика претерпела колоссальные изменения, но суть ее по сей день осталась прежней. Как и прежде, задачей хирурга остается удаление помутневшего хрусталика. Правда, сейчас специалисты не ограничиваются одним лишь удалением, а ставят на место вышедшего из строя органа интраокулярную линзу, которая и выполняет все необходимые функции.

Показания к экстракции катаракты

При всем многообразии современных вариантов лечения катаракты, в некоторых случаях необходима именно ее экстракция. Подобная операция показана при:

Методики экстракции катаракты

Метод экстракции катаракты включает экстракапсулярную и интракапсулярную техники. Их отличие в деталях выполнения вмешательства, а также в применяемом хирургическом инструментарии.

Во время операции экстракапсулярной экстракции катаракты выполняется удаление пораженного хрусталика через роговичный разрез с сохранением хрусталиковой капсулы. Эта капсула в дальнейшем становится естественным барьером, отделяющим искусственную линзу от стекловидного тела.

При выполнении операции интракапсулярной экстракции катаракты используется определенное устройство – хирургический криоэкстрактор. С его помощью пораженный хрусталик мгновенно замораживается до твердого состояния, что делает процедуру его изъятия технически намного проще. Примерзшую к хрусталику капсулу также удаляют. Данный метод имеет свои недостатки: фрагменты хрусталика могут остаться в глазу и вызвать осложнения.

Преимущества и недостатки операции

Среди преимуществ экстракции катаракты называют:

К недостаткам методики обычно относят:

Экстракция что это в медицине. Смотреть фото Экстракция что это в медицине. Смотреть картинку Экстракция что это в медицине. Картинка про Экстракция что это в медицине. Фото Экстракция что это в медицине

Ход операции экстракции катаракты

Техника операции экстракции катаракты во многом напоминает метод факоэмульсификации. Так, до стадии извлечения хрусталика его дробят на несколько частей, что дает возможность сформировать меньший роговичный разрез и облегчить экстракцию.

На первом этапе операции пациента подготавливают и проводят анестезию. При отсутствии у него противопоказаний анестезия включает как местное обезболивание (капли, инъекции), так и общий наркоз.

Вторым этапом хирургического вмешательства становится выполнение разреза роговицы для выполнения дальнейших манипуляций. Далее хрусталик дробится или удаляется целиком, хрусталиковую капсулу очищают от возможных фрагментов и имплантируют ИОЛ. Интраокулярная линза при этом может быть как жесткой, так и гибкой, в зависимости от того, что предпочтительнее. Модель устанавливаемой линзы обычно выбирает сам пациент, и от его выбора во многом зависит эффект операции после восстановления. По окончании процедуры имплантации искусственной линзы на разрез накладывается несколько швов.

Вся операция занимает до 30 минут, хотя при необходимости проведения лечебных хирургических процедур ее длительность несколько увеличивается.

Реабилитация после операции

Зрительные функции восстанавливаются полностью только после снятия швов, происходит это спустя около 4-х месяцев после вмешательства. При этом первые положительные изменения пациент отмечает сразу после проведения экстракции катаракты. Обычно это возможность различать предметы, видеть лица, каждый день отмечать возвращение зрительных функций. Основными слагаемыми быстрейшего окончательного выздоровления становятся: возраст пациента, вид имплантированной ИОЛ, интраоперационные и послеоперационные осложнения.

На результаты операции во многом могут влиять сопутствующие заболевания глаз. Так, наличие поражений сетчатки или зрительного нерва, глаукомы или выраженной близорукости не позволят улучшить зрение пациента на 100%. Более того, они способны стать причиной ухудшения зрительных функций в дальнейшем.

Экстракция что это в медицине. Смотреть фото Экстракция что это в медицине. Смотреть картинку Экстракция что это в медицине. Картинка про Экстракция что это в медицине. Фото Экстракция что это в медицине

Стоимость экстракции катаракты

Цена операции слагается из множество сопутствующих факторов. Так, в случае лечения по ОМС операцию выполнят бесплатно. Пациент при этом должен дождаться своей очереди и провести несколько дней в муниципальном стационаре с соответствующими бытовыми условиями. Стоимость ИОЛ будет озвучена после окончательного ее выбора пациентом. Рыночные цены на интраокулярные линзы колеблются от 2 до 50 тыс. рублей, вне зависимости от статуса предлагающей их клиники.

При обслуживании в частных клиниках, в стоимость операции также включаются: работа хирурга, анестезиолога и проведение предварительного обследования. Стоимость экстракции катаракты в нашей клинике вы можете посмотреть ниже.

Источник

Экстракапсулярная и интракапсулярная экстракция катаракты

Экстракция катаракты (экстракапсулярная и интракапсулярная)

Этот вид хирургического лечения катаракты относят к самому старому, практически не используемому методу. Задача хирурга при этой операции — удалить помутневший хрусталик через большой разрез роговицы, а на его место поставить ИОЛ, которая и будет выполнять функции естественной линзы.

Когда назначают?

Иногда назначается именно экстракция катаракты. Эта необходимость возникает, если:

Выделяют два вида экстракции катаракты — экстракапсулярная и интракапсулярная. Отличаются они методиками проведения и видом используемых инструментов. Экстракапсулярная экстракция катаракты проводится через большой разрез на роговице глаза, через который и удаляется пораженный хрусталик. При этом сохраняется капсула хрусталика, которая служит естественным барьером между искусственной линзой и стекловидным телом. Интракапсулярная экстракция катаракты проводится с помощью специального инструмента — криоэкстрактора. Он мгновенно замораживает хрусталик, делает его твердым, что облегчает его изъятие из глаза. При этом удаляется и сама капсула, которая примерзает к телу хрусталика. Такой метод чреват тем, что возможен остаток частичек хрусталика в глазу, что может вызывать патологические процессы.

Преимущества

Недостатки

Как проходит операция?

Современная экстракция катаракты чем-то похожа на факоэмульсификацию: перед извлечением хрусталик делят на 2-3 части, после чего удаляют. Это позволяет сделать меньший разрез роговицы и облегчить экстракцию.

Начинается операции с предварительной подготовки пациента и обезболивания. Причем анестезия проводится как местная (закапываются капли, делаются инъекции), так и общая. Необходимость в использовании общей анестезии (наркоза) заранее согласуется с пациентом и применяется при отсутствии серьезных противопоказаний.

После этого выполняют разрез роговицы, через который и происходят все манипуляции. Хрусталик удаляется целиком или дробится на кусочки, капсульный мешок очищается от остатков масс. Устанавливают ИОЛ, которая может быть жесткой или мягкой (предпочтительнее). Какая именно линза будет установлена — решает сам пациент. От этого будет зависеть и результат операции, возможности органов зрения после восстановления. После установки искусственного хрусралика проводят герметизацию разреза роговицы путем наложения нескольких швов. Экстракция катаракты с имплантацией ИОЛ длится не более 30 минут. Время может быть увеличено, если одновременно хирург производит другие лечебные процедуры.

Реабилитация

Полное восстановление зрительных функций происходит только после того, как снимают швы. А это производится спустя 3-4 месяца после операции. Однако уже после операции пациент замечает первые изменения: он различает предметы, видит лица людей и может постепенно радоваться улучшению зрительных функций. Окончательный срок реабилитации зависит от возраста человека, используемого вида ИОЛ, как именно проводилась операция, не было ли осложнений. Очень важно убедиться в отсутствии других заболеваний глаз, которые также могут стать причиной сниженного зрения. Глаукома, заболевания сетчатки или зрительного нерва, выраженная близорукость — все это не связано с исходом операции и может спровоцировать дальнейшее ухудшение зрения.

Стоимость

Цены на операцию различаются в зависимости от множества факторов.

Источник

Экстракция что это в медицине

Экстракция что это в медицине. Смотреть фото Экстракция что это в медицине. Смотреть картинку Экстракция что это в медицине. Картинка про Экстракция что это в медицине. Фото Экстракция что это в медицине

Для каждого вида лишайника характерно наличие определенных лишайниковых кислот (например, усниновая, протолихестериновая, лихестериновая кислоты характерны для лишайников рода Сladonia), что служит их систематическим признаком. Усниновая кислота (УК) – желтое кристаллическое вещество, по структуре относящееся к дибензофуранам, обладает высокой активностью по отношению ко многим патогенным организмам вирусной, бактериальной и грибковой природы и имеет антиоксидантные, противоопухолевые, иммуностимулирующие и гепатопротекторные свойства (используется в составе БАД для снижения веса), что позволяет успешно использовать ее при лечении заболеваний различной этиологии [1, 5, 7]. Благодаря таким свойствам применяется в фармакологии, косметике, стоматологии и других областях медицины [6]. Однако, несмотря на положительный опыт использования УК во многих разделах клинической медицины, производство лекарственных средств на ее основе не налажено. Вероятно, известные методы выделения биоактивных веществ из лишайникового сырья не дают желаемых результатов. Известно около 70 видов лишайников, содержащих усниновую кислоту. Однако промышленное значение могут иметь только те из них, в которых количество этой кислоты составляет не менее 0,5 %. Перспективным источником усниновой кислоты является род лишайника Cladonia, в котором это соединение является основным метаболитом.

Классическими методами выделения биологически активных соединений из растительного сырья являются экстракционные с применением органических растворителей. К ним относятся мацерация (настаивание), перколяция (непрерывная фильтрация экстрагента сквозь слой сырья), реперколяция. Для выделения лишайниковых кислот используют различные органические растворители: бензол, ацетон, гексан, этанол, петролейный эфир, хлороформ или их смеси для увеличения выхода целевого продукта [3, 6]. Достоинством этих способов является простота исполнения и оборудования. К недостаткам относятся длительность процесса экстракции, повышенное содержание примесей в экстрактах, трудоемкость, использование значительных объемов растворителей, часто высокая токсичность и летучесть применяемых органических растворителей. Однако, несмотря на указанные недостатки, эти методы находят свое применение в настоящее время, но чаще в модифицированном виде. К таким способам можно отнести экстракцию с использованием техники сверхвысокочастотного излучения (СВЧ).

Наряду с вышеперечисленными традиционными методами экстракции в настоящее время используют современные способы экстрагирования, такие как сверхкритическая флюидная экстракция (СКФЭ), экстракция субкритическими растворителями, ускоренная экстракция жидкими растворителями (ASE), которые позволяют выделять продукты экстракции из растительного сырья, не приводя к их деструкции и максимально сохраняя биологическую ценность всех компонентов. В связи с этим многочисленные исследования, проводимые в России и за рубежом, посвященные разработке новых способов извлечения биологически активных веществ из природных матриц и исследованию их свойств интенсивно расширяются.

Целью данной работы являлось сравнительное изучение возможности выделения усниновой кислоты из лишайникового сырья традиционными методами и методами с использованием современных технологий.

Объектами настоящего исследования являлись слоевища лишайников рода Cladonia stellaris, произрастающие на субарктической территории РФ. Образцы лишайников были собраны на острове Русский Кузов, Белое море.

Воздушно-сухое лишайниковое сырье, предварительно очищенное от механических примесей, измельчали на лабораторной мельнице ЛН-201. Элементный анализ сырья проводили на элементном анализаторе EvroEA 3000 (конфигурация [CNHS]). Образец лишайника содержит 42,9 ± 1,7; 6,68 ± 0,27; 1,19 ± 0,05 % С, Н, и N соответственно, влажность – 6,68 %, зольность – 0,73 %. Для оценки биобезопасности сырья определяли содержание ряда токсичных (в том числе тяжелых металлов), а также биогенных элементов. Анализ выполнен на последовательном волнодисперсионном рентгенофлуоресцентном спектрометре XRF-1800. Элементный состав золы лишайника характеризуется преимущественным содержанием биогенных элементов: калия (27,17 %), магния (5,59 %) и фосфора (7,85 %). Другие элементы (включая некоторые тяжелые металлы) такие как S, Cl, Ti, Mn, Cr, Sr, Br, Cu, Rb, Ni, Pb, присутствуют в количестве менее 1 %, что не оказывает существенного влияния на жизнедеятельность лишайника и выделение из него БАВ.

Выделение лишайниковых кислот проводили различными методами:

– экстракцией органическими растворителями методом настаивания;

– экстракцией органическими растворителями на аппарате Сокслета;

– экстракцией с использованием техники СВЧ;

– ускоренной экстракцией жидкими растворителями;

– сверхкритической флюидной экстракцией диоксидом углерода;

– экстракцией субкритическим диоксидом углерода.

Усниновую кислоту идентифицировали методом ВЭЖХ. Хроматографическое разделение производили на приборе LC-30 Neexera (Shimadzu, Япония). Детектирование проводили с использованием спектрофотометрического детектора, диодная матрица при длине волны 280 нм. Образцы растворяли в ацетоне, фильтровали и вводили в хроматографическую систему. С использованием стандартного образца УК фирмы Aldrich были построены калибровочная зависимость площади пика от концентрации в диапазоне от 1 мкг/л до 0,1 мг/л. Зависимость линейна с коэффициентом корреляции более 0,99.

Экстракция органическими растворителями методом настаивания

Мацерация представляет собой обыкновенное вымачивание в растворителе, при котором происходит разрыхление клеточных стенок растительного сырья и растворение экстрагированных веществ. Навеску лишайника около 5 г помещали в колбу с этиловым спиртом. Настаивание проводили в сушильном шкафу при температуре 70 °С в течение 30 минут. Содержание УК в экстракте составило 24 %, а выход УК от массы а.с. лишайникового сырья – 0,27 %. Для повышения выхода УК данным методом длительность процесса экстракции необходимо значительно увеличить.

Экстракция органическими растворителями на аппарате Сокслета

Выход УК при экстракции различными растворителями на аппарате Сокслета

Источник

ПЦР-диагностика

Полимеразно-цепная реакция (ПЦР) – это одно из самых ярких достижений в сфере молекулярной биологии. Метод получил широчайшее распространение в разных областях науки. Благодаря очень высокой специфичности и чувствительности, метод ПЦР применяется в медицине, биологии, ветеринарии, криминалистике, санитарной службе и других отраслях деятельности человека.
Для анализа методом ПЦР можно использовать любые биологические материалы, которые содержат нуклеиновые кислоты (молекулу ДНК или РНК).

Принцип ПЦР- исследования

Кому мы обязаны появлением метода ПЦР?

Со слов американского биохимика Керри Мюллиса (Kary Mullis), идея идентифицировать живые организмы по короткому участку их генетического кода (ДНК) пришла ему в голову в 1983 году, по пути с работы домой. А в основе этой идеи, лежала работа другого американского биохимика, Артура Корнберга (Arthur Kornberg), которая в свое время не нашла отклика у научного сообщества.

Керри допустил возможность того, чтобы взять молекулу ДНК какого-либо организма, с помощью высокой температуры «распустить» ее спираль на две нити, специфическими маркерами-праймеры пометить уникальные для этого микроорганизма участки ДНК и затем, применив фермент ДНК-полимеразу, создать из двух нитей две новые молекулы ДНК. Но уже содержащие в себе меченные праймеры. И потом останется просто искать эти участки в диагностическом материале.

В итоге, корпорация CETUS, в которой работал Мюлис, выделила ему команду ученых. И в 1985 году, в издании Американского общества генетики человека, появилась публикация с теоретическим обоснованием ПЦР, как метода идентификации генетического материала живых организмов.

Как это все происходит в лаборатории

Экстракция что это в медицине. Смотреть фото Экстракция что это в медицине. Смотреть картинку Экстракция что это в медицине. Картинка про Экстракция что это в медицине. Фото Экстракция что это в медицине

Выделение ДНК

Элонгация

Или синтез. После завершения процесса отжига, в реакционной смеси создают условия для активности полимеразы. Фермент, ориентируясь на молекулы праймеров (а не исходных нуклеиновых кислот), начинает синтез новых ниток ДНК/РНК. Которые становятся копиями исходных, искомых молекул нуклеиновых кислот.
Такой температурный цикл проводится 30 и более раз. В результате, даже при изначально небольшом количестве искомого генетического материала, в реакционной смеси накапливается значительное число «помеченных» праймерами нуклеиновых кислот (растет экспоненциально, с удвоением при каждом цикле).Обнаружить большие количества ДНК/РНК намного проще, за счет чего реализуется еще одно преимущество ПЦР – высочайшая чувствительность.

Детекция

Оценка результатов ПЦР проводится несколькими путями:

Преимущества методики ПЦР

Всего разработано более 10 разных методик амплификации, применяемых лабораториями в зависимости от исходных условий и поставленных целей.
Общим для них есть высокая чувствительность (для положительного результата достаточно 40 (!) или менее искомых копий ДНК в 1 мл образца, то есть вероятность ложноотрицательного ответа ничтожно мала. И очень высокая специфичность: вероятность ложноположительного ответа составляет менее 1%.
Но точность результатов сильно зависит от качества сбора диагностического материала, тщательного соблюдения всех технических требований к каждому этапу и качеству оборудования, расходных материалов (буфера, праймеров, раствора для отмывки и т.д.).

Экстракция что это в медицине. Смотреть фото Экстракция что это в медицине. Смотреть картинку Экстракция что это в медицине. Картинка про Экстракция что это в медицине. Фото Экстракция что это в медицине

Области применения в медицине

В дерматовенерологии ПЦР используют для выявления венерических заболеваний: микоплазменной, хламидийной инфекций, сифилиса, генитального герпеса и др.
Инфекционисты активно используют ПЦР для диагностики туберкулеза, ВИЧ, вирусных гепатитов, герпеса, мононуклеоза, вируса Эпштейн-Барр и др.). А с помощью ПЦР в реальном времени, оценивая вирусную нагрузку, врачи могут составить мнение о динамике заболевания, отклике на лечение, что особенно актуально для пациентов с ВИЧ, принимающих терапию.
Также благодаря ПЦР врачи могут в течение нескольких дней с уверенностью идентифицировать коклюш и паракоклюш, выявить возбудителей эпидемии ОРВИ. Уточняются типы вируса гриппа, циркулирующие на определенной территории, на основании чего появляется возможность разработать эффективную вакцину для каждого сезона гриппа.
В течение суток или быстрее можно установить вид возбудителя кишечной инфекции, а значит – назначить адекватное лечение и обнаружить вероятный источник заражения.
Летом, ПЦР актуальна для диагностики заболеваний, передаваемых иксодовыми клещами: боррелиоза (болезни Лайма), клещевых энцефалитов.
Метод позволяет работать с любым биологическим материалом. Гемотрансмиссивные инфекции (сифилис, ВИЧ, гепатиты, боррелиоз) исследуются по пробе венозной крови или спинномозговой жидкости. Кожные болезни (герпес, грибки) – по соскобу с пораженного участка. Венерические и урологические – по образцу мочи, спермы, влагалищного отделяемого.
Так что в медицине, ПЦР применяется везде, где нужна высокая точность и быстрота получения результатов.

Лабораторные исследования, выполняющиеся методом ПЦР:

Источник

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *